研究内容
背景与目的
原代肝细胞在体外难以扩增。尽管肝细胞生长因子（HGF）和表皮生长因子（EGF）长期被用于维持原代肝细胞的体外培养，但其促增殖效果有限。我们此前研究发现，白介素6（IL6）与HGF和EGF的联合使用（或IL6与其中任一生长因子的组合）可支持肝细胞近乎无限的生长。然而，这些生长因子在肝细胞增殖中的下游信号通路机制尚不明确。
方法
通过转录组分析不同培养条件下信号通路的激活状态。在细胞培养和肝切除小鼠模型中，使用通路抑制剂研究各信号通路在肝细胞生长及肝脏再生中的作用。
结果
我们意外发现，在促增殖培养条件下，通常与生长抑制相关的TGFβ通路被激活。HGF通过MAPK-ERK信号诱导TGFβ通路的活化，阻断TGFβ通路可显著增强H6（HGF+IL6）诱导的肝细胞体外扩增。然而，抑制MAPK-ERK信号几乎完全阻断了H6诱导的细胞生长，表明ERK通路具有双重作用。进一步研究表明，HGF-ERK通路还能上调YAP蛋白水平及其下游Hippo-YAP信号通路相关基因，正向调控肝细胞增殖。在小鼠部分肝切除模型中，阻断激活的TGFβ信号同样显著促进了体内肝脏再生。
结论
本研究揭示了HGF-ERK信号在肝细胞培养中的双重作用。通过抑制生长抑制性的TGFβ通路，可进一步提升H6诱导的肝细胞增殖能力。
