| 人PD1基因真核表达载体构建与鉴定 |
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| 2018-09-04
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| 发表期刊 | 生物过程
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| EISSN | 2164-5582
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| 卷号 | 8期号:2018.3页码:55-60 |
| 发表状态 | 已发表
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| DOI | 10.12677/BP.2018.83007
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| 摘要 |
| 目的：构建含EGFP标签的人程序性死亡受体(hPD-1)的真核表达载体，为后续基因转移实验奠定基础。方法：PCR扩增hPD-1基因编码框，将PD-1和pEGFP-N1质粒双酶切后进行连接转化，构建重组载体pEGFP-N1-PD-1，酶切重组质粒并测序鉴定，将构建好的重组质粒转染HEK293T细胞，并提取蛋白进行Western blot检测。结果：重组真核表达载体pEGFP-N1-PD-1经限制性内切酶分析，双酶切之后的条带与理论值相符，测序结果未见碱基变异，提取转染后细胞的总蛋白进行Western blot可以检测到目标条带。结论：成功构建了pEGFP-N1-PD-1真核表达载体，并且能够在293T细胞中正常表达，为后续研究PD-1基因的功能奠定基础。 |
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| 关键词 | PD1
重组质粒
EGFP
Western Blot
转染
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| 语种 | 中文
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| 引用统计 | 正在获取...
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| 文献类型 | 期刊论文
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| 条目标识符 | https://kms.shanghaitech.edu.cn/handle/2MSLDSTB/40884
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| 专题 | 生命科学与技术学院_本科生
生命科学与技术学院_公共教学平台_生物科学与生物技术基础实验教学中心
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| 通讯作者 | 石金磊 |
| 作者单位 | 上海科技大学 生命科学与技术学院
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| 第一作者单位 | 生命科学与技术学院
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| 通讯作者单位 | 生命科学与技术学院
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| 第一作者的第一单位 | 生命科学与技术学院
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推荐引用方式
GB/T 7714 |
穆宇灵,杨霄,康宇佳,等. 人PD1基因真核表达载体构建与鉴定[J].
生物过程,2018,8(2018.3):55-60.
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| APA |
穆宇灵,杨霄,康宇佳,&石金磊.(2018).人PD1基因真核表达载体构建与鉴定.生物过程,8(2018.3),55-60.
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| MLA |
穆宇灵,et al."人PD1基因真核表达载体构建与鉴定".生物过程 8.2018.3(2018):55-60.
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