上海科技大学知识管理系统

为探讨Piezo1基因敲减对非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭的影响，通过siRNA转染构建Piezo1敲减A549细胞系，经RT-qPCR、 Western blot检测其沉默效果，Piezo1的表达在mRNA水平与蛋白水平都显著下调。通过CCK8法检测敲减后细胞增殖能力变化，通过划痕修复实验检测细胞迁移能力，通过Transwell小室实验检测细胞侵袭能力，通过Fluo-4 AM Ca2+探针成像实验检测胞内Ca2+含量，通过RT-qPCR与Western blot法检测Piezo1下游信号通路相关基因的转录水平及蛋白磷酸化水平。结果表明，Piezo1靶向siRNA能够下调A549细胞系中Piezo1 mRNA及蛋白表达，抑制A549细胞的增殖、迁移、侵袭能力，降低胞内Ca2+水平，导致增殖相关基因Myc、Cyclin-D1、Cyclin-E、CDK2表达水平下调，迁移相关基因E-cadherin、N-cadherin、Vimentin表达水平上调，Ca2+相关信号通路蛋白Akt的磷酸化水平下调，4EBP1蛋白的磷酸化水平显著提高，说明Piezo1基因敲减抑制A549细胞的增殖、迁移及侵袭能力，为非小细胞肺癌的治疗提供了新的分子靶标。